固相萃取柱的填料和容量
固相萃取填料通常是色谱吸附剂,可分为三大类:一类是以硅胶为基质(例如C18、C8等);第二类是以高聚物为基质,例如聚乙烯-二乙烯苯等;第三类是以无机材料为主的,例如弗罗里硅藻土、氧化铝、石墨化碳等。
在选择固相萃取柱时,必须考虑柱容量。
由于我们面对的样品基质通常都较为复杂,c18固相萃取柱哪家好,例如食品、生物样品等等。
在固相萃取中,固相萃取吸附剂对目标化合物吸附的同时,也会吸附同类性质的杂质。
因此,在考虑柱容量是应该是目标化合物加上可被吸附的杂质总量不能超过柱容量。
否则在载样的过程中就可能有部分目标化合物不能被吸附,造成回收率偏低。
固相萃取柱的填料
固相萃取填料通常是色谱吸附剂,大致可以分为三大类,c18固相萃取柱,分别是以硅胶、高聚物、无机材料为基质。
一类是以硅胶为基质,如:Waters Sep-Pak C18固相萃取小柱,硅胶极性很强,呈弱酸性,可被用于正相或反相两种分离模式:正相提取时,极性比硅胶弱,反相提取时非极性比C18 或 C8 的弱。
对于类固醇有着较好的萃取效果通常用于非极性或弱极性化合物的萃取或极性杂质的去除。
主要用于血样、尿样中药品及其代谢物、多肽脱盐、环境样品中的痕量有机化合物富集、饮料中的有机酸。
第二类是以高聚物为基质,如:聚乙烯-二乙烯苯等。
高纯度、高交联度的乙烯-二乙烯基苯聚合物为固定相填装的萃取小柱具有高载样量,可耐受极端 pH 条件和不同的溶剂,对极性化合物具有优异的保留能力。
可用作酸性的、中性的和碱性化合物的通用型吸附剂,通常用于反相条件下保留含有亲水基团的疏水性化合物如:酚类、硝基芳香类等。
第三类是以无机材料为主的,如:弗罗里硅藻土、氧化铝、石墨化碳等。
弗罗里硅土是一种氧化镁复合的极性硅胶吸附剂,以此为基质的萃取小柱适合于从非极性基质中吸附极性化合物,如多多环芳烃、有机氯农残等;石墨化碳黑(CARB)萃取小柱, 以石墨化碳黑为填料,萃取过程非常迅速。
且对化合物的吸附容量比硅胶大一倍有余,由于石墨化碳黑表面的正六元环结构,使其对平面分子有极强的亲和力,非常适用于很多有机物的萃取和净化,尤其适于分离或去除各类基质如水果、蔬菜中的色素、甾醇等物质;以氧化铝为基质的填料有酸、碱、中性三种类型,适用于酸性、碱性的、中性溶剂的分离萃取。
固相萃取柱使用的基本步骤
1.预洗
预洗是用强溶剂预先淋洗小柱,以消除小柱上在生产或储存过程中可能代入的污染物,c18固相萃取柱价格,当在洗脱溶剂的洗脱力强于活化溶剂时一般要实施这一步。
如果产品包装密封并明确注明已进行预洗就无需这一步。
2.活化
首先用较强(洗脱能力的) 溶剂润湿吸附剂,而后再以较弱(洗脱能力的) 溶剂润湿小柱,c18固相萃取柱厂家,从而保证样品在小柱上有足够的保留。
3.上样
选择强度相对较弱的溶剂溶解样品。
液体样品被加到SPE 小柱上后,不保留或弱保留的组分随溶剂流出,待测组分和其他强保留组分保留在吸附上。
4.冲洗
用不会把待测组份洗脱出来的溶剂(样品溶剂或稍强溶剂) 淋洗小柱,随后通常采用抽真空或高速离心来排除残余溶剂。
5.淋洗
用尽量少的较强溶剂将待测组分洗脱出来,而剩余较强的基体组分仍然保留在填料中。
对于收集到的淋洗液,可进一步吹干,用适当溶剂定溶,也可用于直接进样。
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