ELISA试剂盒主要实验原理
·包被:抗原或者能以物理性吸附于固相载体表面,原因是蛋白质和聚乙烯表面间的疏水性部分相互吸附,吸附之后能保持抗原反应等活性;
·标记:抗原或者可通过共价键与酶连接成酶结合物,而此种酶结合物仍能保持其活性和酶的催化特点;
·显色:酶结合物与相应包被在固相载体的抗原或者结合后,也被固定在固相载体上,加入酶的底物之后可出现显色反应,根据反应的颜色深浅可计算抗原或者的相对含量。
ELISA试剂盒——会出现的问题及解决办法
标准曲线线性不佳,或是平行性不好。
a.原因:温育位置避光不好或受到气流干扰。
解决办法: 请确认温育位置既不透光也不透风(如抽屉内)。
b.原因:操作时间拖太久。
解决办法:请在方法熟练后再进行操作。
c.原因:微孔间相互污染。
解决办法: 加样品时,请小心勿溅出微孔外,以免造成其它微孔的污染。
d.原因:标准品或酶标记物所加入的量不一致。
解决办法:请使用已校正过的移液,并确保其与吸头之间有高度密合性。
e.原因:添加样品或试剂的操作方法不正确。
解决办法:加样品或试剂时,庆大霉素ELISA试剂盒价格,吸头请勿接触微孔。
f.原因:洗板过程发生问题(如管路堵塞、洗完板后未立刻进行下一步骤)。
解决办法:请随时监控洗板过程,洗完后立即进行下一步骤。
Elisa试剂盒的操作注意事项
洗刷是ELISA试剂盒操作过程中决议实验胜败的一个关键步骤。
目的是除掉未结合的反响物,间断抗原抗体反响,庆大霉素ELISA试剂盒,除掉标本中与反响无关的成分、游离的酶标物以及反响过程中吸附于固相载体上的非特异性物质。
断定效果须运用Elisa试剂盒测读仪,比色法判读可选择单波长或双波长,根据反响液颜色的不同选用不同波长的滤光片,以空白孔校零测定反响孔的吸光度值。
具有杰出的重复性。
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