ELISA试剂盒的应用技术

ELISA检测试剂盒应用定性夹心检测技术，用合成的HEV多肽抗原包被微孔板板条，这些多肽是中国型HEV毒株氨基酸序列中抗原性很强的肽段，分别来自于该毒株的开放阅读框2和开放阅读框3。
将样品或标准品加入孔中并孵育，如果其中存在HEV IgM，这些就会与HEV 的多肽抗原结合，并固定在上面，氯霉素ELISA试剂盒价格，洗板除去其它非特异性和样品中的其它成份。
然后加入羊抗人IgM-HRP（辣根过氧化物酶）酶结合物，经第二次孵育后，酶结合物就会与孵育结合上的HEV IgM相结合，洗板除去未结合的酶结合物，加入TMB底物溶液，在第三次孵育时会发生酶-底物反应，只有那些含有HEV IgM和酶结合物所形成的复合物的孔才会发生颜色变化，甘肃氯霉素ELISA试剂盒，加入硫酸溶液终止酶和底物间的反应，并在波长: 450nm处测量O.D.值，按照本HEV IgMelisa试剂盒的测试标准， O.D.值大于或等于Cut-Off值的样品被认为是初试阳性。

Elisa试剂盒操作注意事项

1．Elisa试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。

2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，氯霉素ELISA试剂盒报价，洗涤时不影响结果。

3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。
一次加样时间控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排加样。

4．请每次测定的同时做标准曲线，做复孔。
如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔*孔的OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，氯霉素ELISA试剂盒公司，计算时请zui后乘以总稀释倍数（×n×5）。

5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。

6．底物请避光保存。

7．严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以读数为准.

8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按污染物处理。

9．本试剂不同批号组分不得混用。

10. 如与英文说明书有异，以英文说明书为准。

Elisa试剂盒有哪些需要注意的？

1. 跟着病况的进展或由其他因素影响，某些在机体内的含量发作大幅动摇，因此有必要对标本进行预处理。
间接法测定中，标本恰当稀释还可下降非特异性反响。

2. 加样一般运用加液器，在ELISA试剂盒中一般有4次加样：加标本、加酶结合物、加底物和加间断液。
加标本时有必要每份标本运用一支移液器吸嘴，避免交叉污染。
加酶结合物、底物和间断液时则不需更换吸嘴。

3.在成批手艺检测中，还应留神操作时差的影响。
加样及混匀时间的差异，使抗原反响和酶促反响时间不一致，对竞争法及定量检测影响很大，不留神可能会导致过错效果或定量不准。

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