什么是试剂盒？

ELISA试剂盒在国内有许多种叫法，例如：ELISA检测试剂盒、ELISA Kit、酶联试剂盒、酶联吸附测定试剂盒、酶联分析试剂盒、酶免试剂盒等，湖北ELISA试剂盒厂家，比较常见的叫法是ELISA检测试剂盒、酶联吸附测定试剂盒等。

ELISA试剂盒自从60-70年代问世以来，得到全世界科研工作者的认可及推崇，在欧美及中国获得很大的推广，尤其是国内生化领域的长足发展。

ELISA试剂盒的测试要求

做好对照

正式试验时，庆大霉素ELISA试剂盒厂家，应分别以阳性对照与阴性对照控制试验条件，待检样品应作一式二份，以保证实验结果的准确性。
有时本底较高，说明有非特异性反应。

实验条件的选择

在ELISA中，进行各项实验条件的选择是很重要的，其中包括:

（1）固相载体的选择：许多物质可作为固相载体，如聚乙烯、聚丙酰胺和纤维素等。
其形式可以是凹孔平板、试管、珠粒等。
常用的是40孔聚乙烯凹孔板。
不管何种载体，氯霉素ELISA试剂盒厂家，在使用前均可进行筛选：用等量抗原包被，在同一实验条件下进行反应，黄曲霉毒素ELISA试剂盒厂家，观察其显色反应是否均一性，据此判明其吸附性能是否良好。

（2）包被（或抗原）的选择：将（或抗原）吸附在固相载体表面时，要求纯度要好，吸附时一般要求PH在9.0～9.6之间。
吸附温度，时间及其蛋白量也有一定影响，一般多采用4℃ 18～24小时。
蛋白质包被的适浓度需进行滴定：即用不同的蛋白质浓度（0.1、1.0和10μg/ml等）进行包被后，在其它试验条件相同时，观察阳性标本的OD值。
选择OD值大而蛋白量少的浓度。
对于多数蛋白质来说通常为1～10μg/ml。

（3）酶标记工作浓度的选择：首先用直接ELISA法进行初步效价的滴定（见酶标记部份）。
然后再固定其它条件或采取“方阵法”（包被物、待检样品的参考品及酶标记分别为不同的稀释度）在正式实验系统里准确地滴定其工作浓度。

（4）酶的底物及供氢体的选择：对供氢体的选择要求是价廉、安全、有明显地显色反应，而本身无色。
有些供氢体（如OPD等）有潜在的致癌作用，应注意防护。
有条件者应使用不致癌、灵敏度高的供氢体，如TMB和ABTS是较为满意的供氢体。
底物作用一段时间后，应加入强酸或强碱以终止反应。
通常底物作用时间，以10-30分钟为宜。
底物使用液必须新鲜配制，尤其是H2O2在临用前加入。

ELISA试剂盒——会出现的问题及解决办法

标准曲线线性不佳，或是平行性不好。

a.原因：温育位置避光不好或受到气流干扰。

解决办法： 请确认温育位置既不透光也不透风(如抽屉内)。

b.原因：操作时间拖太久。

解决办法：请在方法熟练后再进行操作。

c.原因：微孔间相互污染。

解决办法： 加样品时，请小心勿溅出微孔外，以免造成其它微孔的污染。

d.原因：标准品或酶标记物所加入的量不一致。

解决办法：请使用已校正过的移液，并确保其与吸头之间有高度密合性。

e.原因：添加样品或试剂的操作方法不正确。

解决办法：加样品或试剂时，吸头请勿接触微孔。

f.原因：洗板过程发生问题(如管路堵塞、洗完板后未立刻进行下一步骤)。

解决办法：请随时监控洗板过程，洗完后立即进行下一步骤。

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