ELISA试剂盒的操作方法——间接法

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1.用包被缓冲液将已知抗原稀释至1～10μg/ml，每孔加0.1ml，4℃过夜；

2.次日洗涤3次；

3.加一定稀释的待检样品（未知）0.1ml于上述已包被之反应孔中，置37℃孵育1小时，酶联ELISA试剂盒厂家，洗涤；

4.（同时做空白、阴性及阳性孔对照）于反应孔中，加入新鲜稀释的酶标第二（抗）0.1ml；

5.37℃孵育35-60分钟，ELISA试剂盒厂家，洗涤；

6.然后用DDW洗涤。

其余步骤同“双夹心法”的4、5、6。

Elisa试剂盒——Elisa实验常见问题及解决方案

样品或标准品OD超出正常范围

1  错误的样品或标准品的稀释  完全按照说明书稀释

2  偶联抗体浓度过高  按照说明书调整到的浓度

3  TMB底物孵育时间过长  调整到合适的孵育时间

4  样品或标准品污染  避免污染

5  错误的孵育时间或温度

4  样品或标准品污染  避免污染

5  错误的孵育时间或温度

Elisa试剂盒操作步骤 

1．用盖片镊Elisa试剂盒将盖玻片自75%乙醇中取出，玉米赤霉烯酮ELISA试剂盒厂家，用无菌丝绸布擦拭干净，不要用纱布；

2．将盖玻片轻轻放入6孔培养板（每孔一片）或培养皿中（每个平皿可放置2-3片）；

3．在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时；

4．将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中，使盖玻片完全浸在培养液中；

5．将Elisa试剂盒培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时，将培养板取出，用盖片镊轻轻取出盖玻片，用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及细胞化学检测。

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