亲和柱——亲和层析介绍

将具有特殊结构的亲和分子制成固相吸附剂放置在层析柱中，当要被分离的蛋白混合液通过层析柱时，与吸附剂具有亲和能力的蛋白质就会被吸附而滞留在层析柱中。
那些没有亲和力的蛋白质由于不被吸附，直接流出，从而与被分离的蛋白质分开，亲和柱报价，然后选用适当的洗脱液，改变结合条件将被结合的蛋白质洗脱下来，这种分离纯化蛋白质的方法称为亲和层析。
利用共价连接有特异配体的层析介质分离蛋白质混合物中能特异结合配体的目的蛋白或其它分子的层析技术。

亲和柱亲和层析过程中的注意事项

1、上样

亲和层析纯化生物大分子通常采用柱层析的方法。
亲和层析柱一般很短，通常10cm左右。
上样时应注意选择适当的条件，包括上样流速、缓冲液种类、pH、离子强度、温度等，以使待分离的物质能够充分结合在亲和吸附剂上。

2、洗脱

亲和层析的另一个重要的步骤就是要选择合适的条件使待分离物质与配体分开而被洗脱出来。
亲和层析的洗脱方法可以分为两种：特异性洗脱和非特异性洗脱。

亲和柱——亲和层析的分离原理

生物体中许多大分子化合物具有与其结构相对应的专一分子可逆结合的特性，如抗原与抗体，酶与底物或抑制，与受体等，这种结合往往是专一的而且是可逆的，生物分子间的这种结合力称为亲和力，亲和层析的分离原理简单地说就是通过将具有亲和力的两个分子中的一个固定在不溶性的基质（也称载体）上，利用分子间亲和力的特异性和可逆性，呕吐毒素亲和柱报价，对另一个分子进行分离纯化。
被固定在基质上的分子称为配体，兽药残留亲和柱报价，配体与基质共价结合，构成亲和层析的固定相，伏马毒素亲和柱报价，称为亲和吸附剂，蛋白质的生物特异性可以帮助选择特异性的配体，一般是目的蛋白质与配体结合而不吸附杂质。
蛋白质吸附后再利用洗脱液的快速变换和加入竞争剂的方法进行洗脱。

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